ИГХ-диагностика рецепторного статуса эндометрия (ER, PR, CD138, CD56, LIF)

Иммуногистохимия (ИГХ) — это высокоточный метод диагностики, использующий специфические антитела (маркеры) для выявления и оценки молекулярных свойств тканей. ИГХ-анализ эндометрия позволяет определить чувствительность ткани к эстрогену (ER) и прогестерону (PR), выявить признаки воспаления (маркер CD138), оценить активность иммунных клеток (CD56) и лейкемия-ингибирующего фактора (LIF – в расширенной панели).

Это исследование особенно важно при диагностике бесплодия и подготовке к ЭКО, когда других методов (УЗИ, гистероскопия, гистология) недостаточно для выявления скрытых факторов бесплодия (например, хронического эндометрита). 

Рецептивность эндометрия – что это?

Эндометрий – внутренняя слизистая оболочка матки. Его здоровье и функциональное состояние критически важны для наступления и развития беременности.

Нарушение данной способности — частая, но сложно диагностируемая причина бесплодия и повторных неудач ЭКО. Иммуногистохимический анализ позволяет выявить тонкие молекулярные нарушения, не обнаруживаемые другими методами, и является золотым стандартом диагностики.

ИГХ: принципы и возможности

Иммуногистохимическое исследование является дополнением и продолжением гистологического. Если гистология изучает клеточное и субклеточное строение ткани, то применение ИГХ-маркеров (меченых антител) выявляет наличие и количество специфических белков (антигенов) в клетках.

Антитела, вступившие в реакцию с искомым веществом, окрашиваются, и по интенсивности их окраски (экспрессии) можно оценить содержание каждого антигена в тканевом образце.

Данный анализ позволяет диагностировать бессимптомные нарушения рецептивности, подобрать лечение и значительно повысить шансы на успешную беременность.

Как проводится ИГХ эндометрия?

Диагностика методом ИГХ включает несколько этапов:

1. Забор биоматериала. Используется либо пайпель-биопсия (менее инвазивный метод), либо взятие образца ткани во время гистероскопии. Манипуляции выполняются амбулаторно, с местной анестезией или под коротким наркозом.

2. Гистологическое исследование. Образец ткани фиксируется, обезвоживается, заливается в парафин и нарезается на тонкие срезы, которые кладутся на предметное стекло. Часть срезов используется для гистологии (заключения врача о микроскопическом строении ткани и выявленных патологиях), а другая часть – для постановки ИГХ-реакций.

3. Иммуногистохимические реакции. Срезы помещаются на стекла и обрабатываются специфическими антителами к целевым антигенам.

4. Интерпретация результата. Врач-патоморфолог под микроскопом изучает полученные окраски, оценивает экспрессию каждого маркера и выдает заключение.

Биопсию для данного исследования проводят в лютеиновой фазе менструального цикла, а точнее – в период «окна имплантации».

Окно имплантации и биопсия: почему время так важно?

После овуляции у женщины начинается лютеиновая (от латинского luteus — «желтый») фаза цикла. В норме в этот период:

• На месте лопнувшего фолликула в яичнике образуется желтое тело, вырабатывающее прогестерон;

• Под воздействием прогестерона эндометрий вступает в стадию секреции, готовясь к возможной имплантации эмбриона.

• В рамках лютеиновой фазы существует короткий период максимальной готовности – окно имплантации: в среднем это 6-9 день после овуляции, что соответствует 20-23 дню 28-дневного менструального цикла. Именно в это время эндометрий рецептивен к эмбриону.

ИГХ-анализ пайпель-биопсии, взятой строго в период окна имплантации, позволяет объективно оценить, соответствует ли строение ткани (гистология), ее гормональный статус (ER, PR) и иммунная среда (CD56, CD138, LIF) норме для успешной имплантации. Забор материала в другое время цикла делает исследование неинформативным!

Стандартная панель антител: ER, PR, CD138, CD56

Исследование базово включает 4 маркера:

• ER (эстроген) и PR (прогестерон) – показывают, есть ли на поверхности клеток рецепторы к половым гормонам, и в каком количестве. Адекватное их количество необходимо для нормального роста и функционирования эндометрия.

• CD138 (Синдекан-1) – специфический маркер плазматических клеток. Их обнаружение позволяет выявить хронический эндометрит даже при отсутствии клинических симптомов и видимых изменений на УЗИ.

• CD56 – маркер естественных киллеров (NK-клеток). Эти клетки в норме присутствуют в эндометрии. Однако их значительное повышение может указывать на избыточную иммунную активность, способную повреждать эмбрион или провоцировать воспаление, снижая рецептивность.

Расширенная панель: роль LIF

При повторных неудачах имплантации в ЭКО, особенно если стандартная ИГХ-панель не выявила отклонений, рекомендуется расширенная диагностика. Важным дополнением становится маркер LIF (лейкемия-ингибирующего фактора).

Этот белок способствует "диалогу" между эмбрионом и слизистой матки, подавляя местный иммунный ответ, который может отторгнуть эмбрион, и стимулируя необходимые изменения в строме (основной ткани эндометрия, внутри которой расположены железы и кровеносные сосуды).

Дефицит LIF во время окна имплантации может приводить к бесплодию и неудачам ЭКО даже при идеальных эмбрионах. ИГХ позволяет выявить этот дефицит и помочь в назначении специфической терапии перед следующим протоколом.

Интерпретация результатов

Результат ИГХ-исследования представляет собой заключение, где для каждого исследуемого маркера (ER, PR, CD138, CD56, LIF) указывается:

• Наличие/Отсутствие: обнаружен ли маркер в ткани.

• Локализация: в каких клетках эндометрия он выявлен (эпителий, строма).

• Интенсивность экспрессии: обычно оценивается полуколичественно (слабая, умеренная, сильная) или по проценту окрашенных клеток.

Ключевые аспекты интерпретации заключения

ER/PR. Снижение PR в эпителии и повышение в строме в лютеиновую фазу (особенно в окно имплантации) – норма. Отсутствие снижения PR в эпителии или общее снижение экспрессии – признак нарушения рецептивности. Важно соотношение ER/PR.

CD138. Отсутствие плазматических клеток – норма. Наличие даже единичных кластеров – диагностический признак хронического эндометрита.

CD56. Оценивается количество и локализация NK-клеток. Значительное повышение, особенно вблизи эпителия, ассоциировано с нарушением рецептивности и требует внимания репродуктолога/иммунолога.

LIF (в расширенной панели). Оценивается экспрессия в железистом эпителии. Сниженная или отсутствующая экспрессия в окно имплантации – повод для дальнейшего обследования и лечения.

Заключение ИГХ обязательно сопоставляются лечащим врачом (гинекологом-репродуктологом) с клинической картиной, результатами УЗИ, гистероскопии, анализов гормонального профиля, анамнезом пациентки. На основании всех этих данных врач устанавливает окончательный диагноз и разрабатывает тактику лечения.

ИГХ-диагностика рецепторного статуса эндометрия – это мощный диагностический инструмент, позволяющий заглянуть на молекулярный уровень, выявить скрытые нарушения репродуктивного здоровья, открывая путь к наиболее эффективному лечению и наступлению желанной беременности.

• Образец ткани в парафиновом блоке
• Пайпель-биопсия эндометрия (аспират из полости матки)

2113 Патолого-анатомическое исследование биопсийного (операционного) материала с применением иммуногистохимических методов: диагностика рецепторного статуса эндометрия (фаза секреции) - стандартная

Код по приказу 804н от 13.10.2017: A08.30.013.021.130

Стоимость: 10 500 ₽

- - -

2114 Патолого-анатомическое исследование биопсийного (операционного) материала с применением иммуногистохимических методов: диагностика рецепторного статуса эндометрия (фаза секреции) - расширенная

Код по приказу 804н от 13.10.2017: A08.30.013.021.140

Стоимость: 12 500 ₽

• ИГХ на 4 маркера: ER (эстроген), PR (прогестерон), CD138, CD56; ИГХ 4АТ
• ИГХ на 5 маркеров: ER (эстроген), PR (прогестерон), CD138, CD56, LIF; ИГХ 5АТ
• ИГХ перед ЭКО; 
• ИГХ при бесплодии; 
• ИГХ на рецептивность эндометрия; 
• Иммуногистохимический анализ на "окно имплантации"; 
• Иммуногистохимия  в фазе секреции (стадии секреции)

• ИГХ-диагностика хронического эндометрита (CD20, CD56, CD138, HLA-DR)